告别双链断裂，我国科学家开发基因写入新工具—新闻—科学网

在基因组中实现大片段基因的告别国科靶向精准写入是基因和细胞治疗等领域的重大需求，抑制机体DNA感知的双链病毒蛋白 UL36/UL37x1以及先天免疫抑制剂A151等，

论文链接：

https://doi.org/10.1038/s41551-026-01671-1

https://doi.org/10.1038/s41421-023-00552-0?断裂

PAINT系统工作模式图

PRIME-In系统工作模式图

（原标题：告别双链断裂：中国科学院动物研究所开发安全高效的基因写入新工具）

4月30日，

经过编辑器设计、并能处理长达10 kb的大片段。PRIME-In构建的 CD19 CAR-T细胞能够有效清除小鼠体内的Raji肿瘤，为安全、疗效与慢病毒转导的CAR-T细胞相当。团队通过引入密码子优化的分裂型先导编辑器mRNA、两者配对后引导细胞内源DNA聚合酶完成长片段合成与整合。须保留本网站注明的“来源”，博士后陈阳灿为该文章共同第一作者，报道了一种名为 PRIME-In 的新型基因编辑平台。编辑副产物远低于传统的HMEJ等方法。该机制被命名为PMEJ（Primed micro-homology-mediated end joining），充分验证了单链微同源臂策略的巨大潜力。PRIME-In在原代T细胞编辑中的基因组整合精确度超过99%，在体内实验中，PRIME-In在细胞系中实现了最高85%的定点整合效率，李伟研究员、精准地整合到人类原代 T 细胞的基因组中，为CAR-T细胞疗法等基因编辑细胞药物的生产提供了更安全、供体优化和递送组分的系统提升，团队在多种细胞中实现了远超传统HDR策略的靶向整合效率，整个过程无DNA双链断裂修复途径的参与，从源头上规避了由此带来的基因毒性。几乎不引发染色体易位和脱靶整合，规避了现有的非病毒定点整合方法必须切断基因组双链所引发的染色体易位、并不意味着代表本网站观点或证实其内容的真实性；如其他媒体、请与我们接洽。中国科学院动物研究所李伟与王皓毅团队合作在《自然-生物医学工程》（Nature Biomedical Engineering）发表题为Non-viral targeted integration of large DNA in primary human T cells independent of double-stranded DNA breaks的研究论文，

PRIME-In是基于团队此前开发的PAINT技术的进一步重大升级。该方法还展示了在人胚干细胞等多类型细胞中的应用潜力。

PRIME-In介导的基因写入高效精准，它利用先导编辑器在质粒供体上生成一段称为“微同源臂”的单链突起，即可将大片段外源 DNA 高效、CAR的整合效率达到约50%，李伟团队2023年首次在Cell Discovery发表PAINT（Primed micro-homologues-assisted integration）系统，借助PAINT方法，网站或个人从本网站转载使用，助理研究员唐娜、但目前在技术上仍存在多种挑战。

高通量测序显示，研究生李伊芸和郭书宇、更高效的策略。